Thèse l'Isoforme Embryonnaire de l'Arn Polymérase Iii Humaine Identification de Mécanismes Contribuant à la Transformation Tumorale et l'Établissement de Métastases. H/F - 33

Établissement : Université de Bordeaux
École doctorale : Sciences de la Vie et de la Santé
Laboratoire de recherche : BoRdeaux Institute of onCology
Direction de la thèse : Martin TEICHMANN ORCID 0000000252570510
Début de la thèse : 2025-10-01
Date limite de candidature : 2026-05-20T23:59:59

L'ARN polymérase (Pol) III humaine assure la transcription de petits ARN non traduits impliqués dans la régulation de la croissance cellulaire. Les cellules souches embryonnaires expriment une variante spécifique de la Pol III contenant la sous-unité RPC32, codée par le gène POLR3G. La suppression de l'expression de POLR3G induit la différenciation des cellules souches embryonnaires. Alors que RPC32 est absente des cellules différenciées, elle est en revanche surexprimée dans certains types de cancers, incluant le cancer du sein triple négatif (Haurie et al., 2010 ; Lautré et al., 2022).
Nos résultats montrent que la délétion de POLR3G par CRISPR/Cas9 inhibe la tumorigenèse. Toutefois, les mécanismes moléculaires par lesquels l'expression de POLR3G contribue au développement tumoral restent à ce jour mal compris. Le projet de recherche proposé vise à élucider ces mécanismes et à déterminer comment POLR3G participe à la transformation tumorale.
Grâce à des analyses de séquençage de l'ARN, nous avons identifié non seulement plusieurs gènes d'ARN non-codants, mais aussi quelques centaines codant des protéines dont l'expression dépend de POLR3G. Parmi eux, certains jouent un rôle clé dans la transformation tumorale et la formation de métastases. En s'appuyant sur des approches de biologie moléculaire et cellulaire, l'étudiant.e en thèse caractérisera la fonction de ces gènes dans la tumorigenèse dépendante de POLR3G.

Lautré W, Richard E, Feugeas JP, Dumay-Odelot H, Teichmann M. The POLR3G Subunit of Human RNA Polymerase III Regulates Tumorigenesis and Metastasis in Triple-Negative Breast Cancer. Cancers (Basel). 2022 Nov 22;14(23):5732. doi: 10.3390/cancers14235732.

Haurie, V., Gaillard-Durrieu, S., Dumay-Odelot, H.,... and M. Teichmann (2010). Two forms of human RNA polymerase III with specific functions in cell growth and transformation. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 107(9):4176-81.

POLR3G est une sous-unité de l'ARN polymérase III spécifiquement exprimée dans les cellules souches embryonnaires et dans certains types de cancer. Sa suppression amène à la différenciation des cellules souches embryonnaires et supprime la croissance de cellules cancéreuses. Les mécanismes moléculaires qui peuvent expliquer les actions de POLR3G dans la tumorigenèse ne sont pas encore connus/
POLR3G is a subunit of RNA polymerase III that is specifically expressed in embryonic stem cells and in certain types of cancer. Its depletion induces differentiation of embryonic stem cells and suppresses the growth of cancer cells. The molecular mechanisms that may explain the role of POLR3G in tumorigenesis are not yet known.

Décortiquer les mécanismes moléculaires à travers desquels la sous-unité POLR3G de l'ARN polymérase III contribue à la transformation tumorale/
To dissect the molecular mechanisms through which the POLR3G subunit of RNA polymerase III contributes to tumor transformation.

En utilisant des méthodes de biologie moléculaire, de biologie cellulaire et de biochimie, nous allons identifier les mécanismes moléculaires qui sont régulés par l'expression de POLR3G et qui régulent la transformation tumorale. Les techniques incluront le séquençage d'ARN et d'ADN, l'immunoprécipitation de la chromatine, la culture des cellules humaines, des tests d'invasion et de migration de cellules, la préparation d'extraits cellulaires et la purification de protéines de celles-ci, la spectrométrie de masse ainsi qu'un vaste panel de techniques de biologie moléculaire (techniques CRISPR/CAS9; RT-qPCR; clonage; préparation d'ADN génomique; préparation d'ARN, etc.)/
Using molecular biology, cell biology, and biochemistry approaches, we will identify the molecular mechanisms regulated by POLR3G expression that control tumor transformation. Techniques will include RNA and DNA sequencing, chromatin immunoprecipitation, human cell culture, cell invasion and migration assays, preparation of cell extracts and protein purification, mass spectrometry, as well as a wide range of molecular biology techniques (CRISPR/Cas9-based technologies, RT-qPCR, cloning, genomic DNA preparation, RNA extraction, etc.).